人外周血淋巴細胞未來發(fā)展規(guī)劃
更新時間：2016-07-19 點擊：1572
人外周血淋巴細胞未來發(fā)展規(guī)劃
人外周血淋巴細胞為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400與泛影酸葡甲胺，適用于從血液分離所需細胞，在醫(yī)療和醫(yī)學生物學研究中廣泛應(yīng)用。其他人及動物多種比重細胞分離液。
人外周血淋巴細胞因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同，所以用戶在定制分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。通常情況下人外周血淋巴細胞是沒有分裂細胞的，只有在異常情況下才能發(fā)現(xiàn)。人外周血淋巴細胞中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期的非增殖狀態(tài)。體外培養(yǎng)時經(jīng)一定劑量的植物血凝素（PHA）刺激，T淋巴細胞可轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨湍讣毎?，重新進入增殖周期，進行有絲分裂。
人外周血淋巴細胞經(jīng)過68-72小時（三個周期）的短期培養(yǎng)，即可產(chǎn)生大量的增殖期細胞群，用秋水仙素（細胞分裂阻斷劑）積累分裂相，可使處在分裂期的淋巴細胞停留在分裂中期或早中期，從而獲得足夠的可供分析的中期分裂相。人外周血淋巴細胞先以碘酒和75%乙醇消毒皮膚。用2ml滅菌注射器吸取約0.2ml肝素,作靜脈穿刺，抽取外周靜脈血1ml。
人外周血淋巴細胞是體外淋巴細胞培養(yǎng)成敗的關(guān)鍵問題，因此，要考慮它的質(zhì)量和濃度。鹽水提取物一般冰凍保存的時間不宜過長，時間長了效價減低。濃度一般用1％～2％，每毫升培養(yǎng)液加0.2～0.4ml；人外周血淋巴細胞濃度過高可能會導致紅細胞凝集。培養(yǎng)箱的溫度應(yīng)控制在37±0.5℃，溫度過高或過低均會影響細胞生長。培養(yǎng)基的pH值應(yīng)該在7.2-7.4左右，低了細胞生長不良，高了細胞則會出現(xiàn)輕度的固縮。
人外周血淋巴細胞為帶有乳光或微乳光的滅菌水溶液。主要成分是Ficoll 400與泛影酸葡甲胺，適用于從血液分離所需細胞，在醫(yī)療和醫(yī)學生物學研究中廣泛應(yīng)用。其他人及動物多種比重細胞分離液。
人外周血淋巴細胞因不同種屬不同比重分離液的細胞離散系數(shù)及細胞帶電不同，所以用戶在定制分離液時應(yīng)提供所需分離液的比重、動物的種屬及被分離細胞的名稱。通常情況下人外周血淋巴細胞是沒有分裂細胞的，只有在異常情況下才能發(fā)現(xiàn)。人外周血淋巴細胞中的小淋巴細胞幾乎都處于G1期或G0期的非增殖狀態(tài)。體外培養(yǎng)時經(jīng)一定劑量的植物血凝素（PHA）刺激，T淋巴細胞可轉(zhuǎn)變?yōu)榱馨湍讣毎?，重新進入增殖周期，進行有絲分裂。
人外周血淋巴細胞經(jīng)過68-72小時（三個周期）的短期培養(yǎng)，即可產(chǎn)生大量的增殖期細胞群，用秋水仙素（細胞分裂阻斷劑）積累分裂相，可使處在分裂期的淋巴細胞停留在分裂中期或早中期，從而獲得足夠的可供分析的中期分裂相。人外周血淋巴細胞先以碘酒和75%乙醇消毒皮膚。用2ml滅菌注射器吸取約0.2ml肝素,作靜脈穿刺，抽取外周靜脈血1ml。
人外周血淋巴細胞是體外淋巴細胞培養(yǎng)成敗的關(guān)鍵問題，因此，要考慮它的質(zhì)量和濃度。鹽水提取物一般冰凍保存的時間不宜過長，時間長了效價減低。濃度一般用1％～2％，每毫升培養(yǎng)液加0.2～0.4ml；人外周血淋巴細胞濃度過高可能會導致紅細胞凝集。培養(yǎng)箱的溫度應(yīng)控制在37±0.5℃，溫度過高或過低均會影響細胞生長。培養(yǎng)基的pH值應(yīng)該在7.2-7.4左右，低了細胞生長不良，高了細胞則會出現(xiàn)輕度的固縮。
