FICOLL PLUS 不連續(xù)密度梯度分離液使用說(shuō)明

技術(shù)文檔編號(hào)：TBD0054SOP

ICLL PLUS不連續(xù)密度梯度分離液與梯度制備稀釋液配比稀釋后，可形成不同濃度（密度）梯度分離液，經(jīng)低速（200-1000g）離心于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)可達(dá)到滿意的細(xì)胞分離效果。FICOLL PLUS 不連續(xù)密度梯度分離液不穿透細(xì)胞，無(wú)毒害，成功的用于動(dòng)物細(xì)胞的分離。

試劑組成

名稱：FICOLL PLUS 密度梯度原液 貨號(hào)：P1114  100ml  梯度制備稀釋液 100ml

【簡(jiǎn)介】

FICOLL PLUS 不連續(xù)密度梯度分離液與梯度制備稀釋液配比稀釋后，可形成不同濃度（密度）梯度分離液，經(jīng)低速（200-1000g）離心于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)可達(dá)到滿意的細(xì)胞分離效果。FICOLL PLUS 不連續(xù)密度梯度分離液不穿透細(xì)胞，無(wú)毒害，成功的用于動(dòng)物細(xì)胞的分離。

【操作方法】

• 不同濃度（密度）分離溶液的制備，使用梯度制備稀釋液參考下表將原液稀釋至所需濃度：

• 梯度分離層的制備：將梯度分離液由高密度至低密度逐層加入至離心管內(nèi)，加入后應(yīng)可見(jiàn)明顯的梯度界面。
• 上樣：根據(jù)不同目的細(xì)胞，加入不同體積血液樣品或單細(xì)胞懸液（樣本體積及細(xì)胞濃度不宜過(guò)高，否則影響細(xì)胞的分離及回收）。
• 離心：400-600g 離心 20-30min。根據(jù)不同樣本個(gè)體差異及目的細(xì)胞特點(diǎn)，用戶可適當(dāng)調(diào)節(jié)離心力及離心時(shí)間（離心力zui大不超過(guò) 1000g）。
• 取樣：當(dāng)所要分離的細(xì)胞絕大部分在兩層的界面時(shí)，可逐層去除分離溶液后收集界面部位的細(xì)胞;有時(shí)大部分細(xì)胞位于分離液層中,則需要逐層收集。收獲含有分離液的細(xì)胞經(jīng) 2 次洗滌后可供培養(yǎng)或檢測(cè)用。

【注意事項(xiàng)】

• 實(shí)驗(yàn)全過(guò)程需在 20℃±2℃下進(jìn)行，否則影響離心效果。
• 由于多層分離溶液之間密度差別不大，因此離心機(jī)加速、降速時(shí)要慢，要平穩(wěn)。
• 試劑瓶蓋需蓋緊，防止蒸發(fā)和污染。

【儲(chǔ)存條件及有效期】常溫保存，有效期 2 年。本品易感染細(xì)菌，需無(wú)菌條件操作。無(wú)菌條件下操作，啟封后置常溫保存。如 4℃保存，本分離液易出現(xiàn)白色結(jié)晶，影響分離效果。

【特殊細(xì)胞分離試劑盒舉例】

1. 富含 NK 活性大顆粒淋巴細(xì)胞(LGL)的純化試劑盒（產(chǎn)品貨號(hào)：NK2011H）

• 淋巴母細(xì)胞純化和死細(xì)胞去除試劑盒（產(chǎn)品貨號(hào)：P1114B）
• 【人不同血細(xì)胞的漂浮密度】